岛津LC-10AT液相色谱操作

1．目的

规范岛津LC-10AT型高效液相色谱系统的使用和维护。

2．范围

本规程适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱系统的使用和维护。

3．职责

质检室仪器分析员负责岛津LC-10AT型高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4．规程

4.1系统组成：本系统由2个LC-10ATvp溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、Rheodyne7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、SCL-10AVP系统控制器、CLASS-VP（Ver.6.1）工作站和IBM台式电脑等组成。

4.2准备

4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。

4.2.2根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。

4.2.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

4.2.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.3开机

4.3.1接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机。

4.3.2启动CLASS-VP工作站

4.3.2.1确认仪器、系统控制器启动后，打开计算机电源，并从Windows的任务栏中选择Start>Programs>Chromatography>CLASS-VP以打开CLASS-VP菜单窗口。（可以通过桌面上的快捷方式，迅速打开CLASS-VP主菜单）

4.3.2.2在MainMenu窗口中双击Instrument图标。

4.3.2.3输入用户名和口令，以登录CLASS-VP。缺省情况下，已经用户名和口令分别为“system”和“2001”。

4.3.2.4当SCL-10Avp发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，Instrument窗口打开。

4.3.2.5启动色谱图监视器

4.3.2.5.1从Windows任务栏中选择Program>Chromatography>ChromatogramMonitor以打开ChromatogramMonitor窗口。

4.3.2.5.2根据需要设置受监视项的类型和格式。

4.3.2.6启动脱机处理

4.3.2.6.1在MainMenu窗口中双击OfflineProcessing图标。

4.3.2.6.2双击为数据采集而设置的仪器名称，以打开仪器进行脱机处理。

4.4CLASS-VP初始系统设置（设置方法缺省参数）

4.4.1单击“New”按钮，并接着单击NewMethod即可初始化方法参数。

4.4.2从Option选项卡的Method菜单中选择命令，并在对话框中更改每条命令的参数，以选择常用的选项。

4.4.3选择File>Method>SaveasDefault即可将在此处设置的选项保存成缺省参数。

4.5设置分析参数

4.5.1设置LC参数

4.5.1.1设置新的分析参数时，请从通过单击“New”按钮打开的列表中选择NewMethod，则将加载缺省方法参数，且方法文件名“Untitled.met”将显示在LCSetupAssistant窗口中，通过单击Open按钮即可打开现有的方法文件。

4.5.1.2通过在LCSetupAssistant窗口中单击泵和检测器的图标来配置LC参数。使用时钟图标输入时间程序命令。

4.5.1.3选择File>Method>Saveas并输入方法名称。

4.5.2将方法下载到SCL-10Avp：完成创建方法之后，单击下面的图标即可将该方法下载到SCL-10Avp上。下载完成时，出现一个消息窗口，请单击OK。

4.5.3启动仪器控制：激活SCL-10Avp，将液体流量调整到已下载的方法参数。当所有组分稳定时，出现“Ready”指示灯，且状态栏变为绿色。

4.5.4设置方法（斜率）：

4.5.4.1请在检测器的基线稳定之后选择Control>PreviewRun或单击工具栏上的“Preview”按钮。

4.5.4.2单击数据图形之后，再在Integration工具栏上单击“SLOPE”按钮，即可从基线测量斜率的参考值。

4.5.4.3单击SLOPE对话框中的Addtotable按钮，即可在Method>IntegrationEvents表中记录此设置。

4.5.5设置方法（自定义报告）：单击工具栏上的“Report”按钮，打开MethodCustomReport窗口；单击“Open”按钮，然后选择OpenReportTemlate打开一个模板文件。

4.5.6保存已更改的方法：要当前名称保存方法文件，亦即覆盖原来的名称，请从菜单中选择File>Method>Save命令，或单击“Save”按钮，然后单击下拉菜单上的SaveMethod。4.6平衡系统

4.6.1系统的操作

4.6.1.1基线检查

4.6.1.2单击LCSetupAssistant窗口中“BaselineCheck”按钮。

4.6.1.3指定测量噪音和漂移的起始时间和结束时间，对于Noise的Threshold值，请输入期望的满刻度值的大约1/100；对于Drift的Threshold值，请输入1/10。单击Start开始测量。测量结束后，测得的噪音值和漂移值将出现在Status区域里。

4.6.1.4采集数据之前要检查基线，如果基线检查检查合格，即可立即开始采集。如果ExportonFail对话框已经选中，并且在指定的Maximum时间内重复进行基线检查仍然失败，则不会进行数据采集。

4.6.1.5启动和关闭单击LCSetupAssistant窗口中的Startup/ShutDown按钮。

4.6.1.5.1设置启动条件

4.6.1.5.1.1在Startup窗口中指定启动的DateandTime，当达到指定的日期和时间时即可下载指定的方法文件参数。

4.6.1.5.1.2如果此处未指明方法文件，则使用最近使用的方法文件。如果需要，请在OfflineProcessing窗口中创建一个用于启动的方法文件，并在此处指定它。

4.6.1.5.2设置关闭条件

4.6.1.5.2.1在OfflineProcessing模式下创建一个用于关闭的方法。通常情况下需要将泵的流速设置到低（或为零），并且需要关闭检测器的灯管，等等。用一个新的文件名将此方法保存到磁盘上。

4.6.1.5.2.2单击ShutDown窗口中“Open”按钮以选择关闭方法文件。另外，如果需要，也可选中或取消选中“SampleCoolerOFF”或“DegasserOFFAfterCoolDown”选项。

4.6.2等度洗脱方式

4.6.2.1按A泵的[pump]键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。

4.6.2.2检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。

4.6.2.3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.5.6操作。

4.6.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

4.6.3梯度洗脱方式

4.6.3.1以检验方法规定的梯度初始条件，按4.6.2项下方法平衡系统。

4.6.3.2在进样前运行1~2次空白梯度。方法：按A泵的[run]键，prog.run指示灯亮，梯度程序运行；程序停止时，prog.run指示灯灭。

4.7进样、采集运行

4.7.1进样

4.7.1.1进样前按检测器[zero]键调零，按软件中[零点校正]按钮校正基线零点，再按一下[查看基线]按钮使其弹起。

4.7.1.2用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。

4.7.2采集运行

4.7.2.1从菜单栏中选择Control>ShowTray。或者，单击LCSetupAssistant窗口中的“SingleRun”按钮或工具栏上的SingleRun按钮。指定所需的项并单击Start按钮。

4.7.2.2记录自动启动和关闭：单击LCSetupAssistant窗口中的Start/ShutDown按钮。在Start/ShutDown对话框中单击需要记录的Startup、ShutDown和Startup/ShutDown中的任一按钮并确认或更改设置。单击Submit按钮进入待机对话框，该对话框停留在屏幕上等候执行设置。

4.7.2.3终止采集。